常见问题 |
可能原因 |
解决方案 |
背景值或阴性对照值偏高 |
背景孔被污染 |
实验时使用封板摸避免污染 |
洗涤不充分 |
增加洗涤次数和洗涤时间 |
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TMB显色液被污染 |
显色液添加之前应是透明的,使用干净的容器添加显色液 |
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整块板信号值偏低 |
检测抗体或底物未添加 |
按照说明书实验步骤要求 |
不同试剂添加顺序错误 |
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不合适的孵育时间、温度 |
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标准曲线不佳 |
校准品稀释有误 |
重新计算并按要求稀释校准品 |
校准品储存不当 |
储存在-20℃~80℃,避免反复冻融 |
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信号值高且标曲曲线信号值饱和 |
校准品的添加量有误 |
按照说明书实验步骤要求 |
校准品/样本、检测抗体、底物孵育时间太久 |
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样本值在标曲范围之外 |
样本不含或含低于检测限的目标物 |
如果样本低于检测限,可以添加更多量的样本体积 |
样本含有更高浓度的目标物 |
稀释一定倍数的样本 |