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ELISA检测样本处理是一个关键步骤，以下是几种常见样本类型的处理方法：
血液样本
1、血清:
① 将收集于血清分离管的全血样本，在室温放置 2 小时或 2-8℃过夜。（这是一个让血液自然凝固的
过程，温度越低，凝集越缓慢，可根据需要添加促凝剂。）
② 1000×g 离心 20 分钟，取上清。
③ 可立即检测，或分装冻存于-20℃或-80℃。
2、血浆（柠檬酸，EDTA, 肝素）：
① 血浆样本需要抗凝，将全血收集到干净的含抗凝剂的试管中，轻轻混匀。
② 标本在采集后的 30 分钟内于 2-8℃ 1000×g 离心 15 分钟，取上清。
③ 可立即检测，或分装冻存于-20℃或-80℃。
3、细胞培养上清:
① 使用 96，24，6 孔板，（贴壁或悬浮）细胞密度达到 60-90%。
② 使用 6-10mm 培养皿，T25/T75 细胞培养瓶，（贴壁或悬浮）细胞密度达到 60-90%。
③ 悬浮细胞：2-8℃，2500rpm 离心 5min，收集澄清的细胞培养上清。
④ 贴壁细胞：直接收集上清液，2-8℃，2500rpm 离心 5min，收集澄清的细胞培养上清。
⑤ 立即用于检测，或分装于-80℃冻存备用。
4、组织样本
组织样本一般制成组织匀浆，处理方法如下：
① 使用干净的工具解剖目标组织，尽快置于冰上，以防被蛋白酶降解。（暂时不处理的组织，置于圆底微量离心管中，浸入液氮中“速冻”，在 -80℃ 下存储样品备用）
② 用预冷的 PBS 缓冲液（0.01M，pH=7.4）洗涤组织去除残留的血液，称重后备用。若组织块较大，需先剪碎。
③ 在冰上用研磨缓冲液（常用 PBS 缓冲液，但最好使用 50mM Tris+0.9%NaCL+0.1% SDS,PH 7.3。或者中等强度 RIPA 细胞裂解液，注意 RIPA 裂解液 PH 值需为 PH7.3，建议不要使用含 NP-40，Triton X-100 和高浓度 DTT 的组分，会抑制抗原抗体反应。）研磨组织匀浆（加入研磨缓冲液的体积取决于组织的重量。一般情况下，每 1 克组织碎片应使用 9ml 研磨缓冲液。另外建议在研磨缓冲液中加入一些蛋白酶抑制剂，如 1mM PMSF）。得到的匀浆液可再利用超声破碎或反复冻融进一步处理（超声破碎过程中，需冰浴降温；反复冻融法可重复 2次）。
④ 将制备好的匀浆液于 5000×g 离心 5 分钟，留取上清即可检测。或分装冻存于-20℃或-80℃。
⑤ 根据实验需要，组织匀浆样本可先定量总蛋白,以便于统计分析数据，一般调整总蛋白浓度至 1-3mg/ml。某些组织样本，如肝脏，肾脏，胰腺因含有较高浓度的内源性过氧物酶, 在样品浓度较高的情况下会和试剂盒底物反应出现假阳性。
注 意 事 项：若为皮肤组织，离心后，需去除上层脂肪，以及下层沉淀，取中间层样本用于检测。
这些处理方法确保了ELISA实验的准确性和重复性。在实际操作中，应严格按照试剂盒说明书进行操作，以避免非特异性显色反应等错误。
